在Western Blot實(shí)驗中,蛋白Marker的作用就像是參照標尺,用于目標蛋白分子量大小的確定、蛋白分離成功與否的判斷等。因此,選擇合適的蛋白 Marker,對實(shí)驗來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,那你知道蛋白Marker的分類(lèi)是如何劃分的嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、非預染蛋白Marker
非預染蛋白Marker是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預混液,方便不同大小的蛋白比較。其條帶在結合染料時(shí),分子量不會(huì )改變,可準確評估SDS-PAGE的蛋白樣品分子量。
非預染蛋白Marker在電泳過(guò)程中看不到,電泳結束后經(jīng)過(guò)蛋白染色后才能起指示作用,無(wú)法在實(shí)驗過(guò)程中起預示參照作用,屬于“后知后覺(jué)"型的。
二、預染蛋白Marker
預染蛋白 Marker 在生產(chǎn)時(shí)就結合了染料,所以不同分子量的條帶會(huì )呈現出不同顏色,讓我們在電泳過(guò)程中就能輕松識別。預染蛋白Marker則可以在電泳時(shí)、電泳后,以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率,預染蛋白Marker的出現方便了實(shí)驗人員的操作。
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