細胞凋亡簡(jiǎn)介
細胞凋亡分為病理性凋亡和生理性凋亡兩種,生理性凋亡由遺傳控制,受既定程序(或基因)調控,屬于程序性的細胞死亡;病理性凋亡是非遺傳控制的細胞的意外壞死,區別于細胞壞死。
流式細胞檢測原理
細胞凋亡時(shí)在細胞、亞細胞和分子水平上發(fā)生特征性改變。由于凋亡細胞核的改變,熒光染料對凋亡細胞的DNA可染性發(fā)生改變,主要是DNA可染性的降低。凋亡細胞形態(tài)的改變影響光的散射性,在流式細胞儀中,散射光有兩種:前散射光和側散射光,前散射光與細胞的大小有關(guān),側散射光與細胞內顆粒多少有關(guān),反應的是細胞內光的散射情況。
Annexin-V是一種分子量在35~#6kDa的鈣離子依賴(lài)性磷脂結合蛋白,能與細胞凋亡過(guò)程翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine PS)高親和力特異性結合,以標記的FITC的Annexin-V作為探針,利用流式細胞儀檢測細胞凋亡。PI是一種核苷酸,它不能透過(guò)完整的細胞膜,但在凋亡的中晚期的細胞和死細胞,PI能夠透過(guò)而使細胞核染成紅色,將Annexin-V與PI匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞以及死細胞區分開(kāi)。
實(shí)驗室檢測流程
1、收集細胞
2、洗滌細胞
3、預冷的70%乙醛固定細胞
4、PBS細胞重懸
5、細胞過(guò)濾
6、PI染色,4℃避光30min
結果判斷
PI用氬離子激發(fā)熒光,激發(fā)光波長(cháng)為488 nm,發(fā)射光波長(cháng)大于630 nm,產(chǎn)生紅色熒光分析PI熒光強度的直方圖也可分析前散射光對側散射光的散點(diǎn)圖。
檢測示例
客戶(hù)提供
1、實(shí)驗信息,包括細胞類(lèi)型,細胞處理藥物和條件。
2、實(shí)驗結果要求等。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專(zhuān)業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見(jiàn)對實(shí)驗方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿(mǎn)意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開(kāi)展實(shí)驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實(shí)驗原始結果和分析結果、實(shí)驗流程、實(shí)驗條件等等。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗材料和儀器,滿(mǎn)足項目課題實(shí)驗需要。
2、專(zhuān)業(yè)的操作人員。
3、高規格實(shí)驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿(mǎn)意。
咨詢(xún)與訂購
感謝您選擇我們的服務(wù),如果您有任何問(wèn)題,請聯(lián)系我們,我們將竭誠為您解答和服務(wù)。
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