數字PCR突變檢測介紹
數字PCR(digital PCR,dPCR)通過(guò)將微量樣品進(jìn)行微滴化處理,即稀釋和分液,直每個(gè)細分樣品中所含有的待測分子數一般不超過(guò)1(0或1)個(gè),將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬(wàn)個(gè)納升級的微滴。再將所有微量樣品在相同條件下進(jìn)行PCR擴增反應,使含有目標分子的微量樣品中的目標分子增加成千上萬(wàn)倍,產(chǎn)生強的熒光信號,后對發(fā)生了擴增反應的微量樣品進(jìn)行統計,有熒光信號的微滴判讀為1,沒(méi)有熒光信號的微滴判讀為0,根據泊松分布原理及陽(yáng)性微滴的個(gè)數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度。
數字PCR技術(shù)在稀有突變檢測、microRNA表達、無(wú)創(chuàng )產(chǎn)前篩查、拷貝數變異、測序文庫定量、評估基因編輯效率(GEF)等方面有著(zhù)很大的應用潛力,未來(lái)將會(huì )得到進(jìn)一步的發(fā)展。
技術(shù)原理
技術(shù)優(yōu)勢
1、高靈敏度:通過(guò)放大單分子信號,有效消除背景噪音。
2、高準確性:能夠實(shí)現定量初始模板中的分子數。
3、檢測限超低:能夠檢測出微量突變和低拷貝量分子。
與普通熒光定量PCR的區別
傳統的實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)技術(shù)依靠標準曲線(xiàn)或參照基因來(lái)測定核酸量,是一種相對定量技術(shù)。在靶分子數目極少或者模板濃度差異細微時(shí),其檢測靈敏度、度都受到很大限制。
作為第三代PCR技術(shù)的數字PCR,通過(guò)精細的微滴化處理,能夠直接檢測統計目標核酸分子的數目,不再依賴(lài)任何參照,可確定低單個(gè)待測核酸分子,實(shí)現定量。
服務(wù)內容
1、項目咨詢(xún),包括樣本類(lèi)型,基因和檢測突變位點(diǎn)的選取。
2、DNA樣本的提取和質(zhì)檢。
3、引物和探針的設計、合成與優(yōu)化。
4、實(shí)驗操作。
5、數據分析和項目報告。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專(zhuān)業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見(jiàn)對實(shí)驗方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿(mǎn)意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開(kāi)展實(shí)驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實(shí)驗原始結果和分析結果、實(shí)驗流程、實(shí)驗條件等等。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗材料和儀器,滿(mǎn)足項目課題實(shí)驗需要。
2、專(zhuān)業(yè)的操作人員。
3、高規格實(shí)驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿(mǎn)意。
咨詢(xún)與訂購
感謝您選擇我們的服務(wù),如果您有任何問(wèn)題,請聯(lián)系我們,我們將竭誠為您解答和服務(wù)。
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