TaqMan探針?lè )ㄊ轻槍NA上的SNP位點(diǎn)設計PCR引物和TaqMan探針,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴增檢測的方法,通常用于少量SNP位點(diǎn)的分析,核酸定量分析以及腫瘤細胞突變分析等。
探針的5’-端和3’-端分別標記一個(gè)熒光報告基團(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一個(gè)熒光淬滅基團(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。當熒光探針保持完整時(shí),5′-端報告基團經(jīng)儀器光源激發(fā)的熒光正好被近距離的3′端熒光基團淬滅,儀器檢測不到5′端報告基團所激發(fā)的熒光信號。
PCR擴增時(shí),加入一對特異引物的同時(shí),加入一對特異性的熒光探針,該探針只與模板特異性地結合,其結合位點(diǎn)在兩條引物之間。當溶液中存在DNA目的片段時(shí),熒光探針與模板退火結合,隨著(zhù)PCR的進(jìn)行,熱啟動(dòng)Taq酶在鏈延伸過(guò)程中遇到與模板結合的探針,其5′-3′外切酶活性(此活性是雙鏈特異性的,游離的單鏈探針不受影響)就會(huì )切割探針,釋放5′-端報告基團游離于反應體系中,遠離3′-端熒光淬滅基團的屏蔽,破壞兩熒光分子基團間的能量轉移(FRET),因此5′-端報告基團受激發(fā)所發(fā)射的熒光信號就可以被探頭檢測到。每擴增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現了熒光信號累積與PCR產(chǎn)物形成的同步,熒光信號的強度能夠代表模板DNA的拷貝數。
技術(shù)原理
結果示例
服務(wù)內容
1、基因和SNP序列信息分析。
2、實(shí)驗方案討論與確定。
3、引物和探針的設計優(yōu)化。
4、引物和探針的合成。
5、qPCR實(shí)驗。
6、數據分析整理。
7、報告生成。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專(zhuān)業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見(jiàn)對實(shí)驗方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿(mǎn)意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開(kāi)展實(shí)驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實(shí)驗原始結果和分析結果、實(shí)驗流程、實(shí)驗條件等等。
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗材料和儀器,滿(mǎn)足項目課題實(shí)驗需要。
2、專(zhuān)業(yè)的操作人員。
3、高規格實(shí)驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿(mǎn)意。
咨詢(xún)與訂購
感謝您選擇我們的服務(wù),如果您有任何問(wèn)題,請聯(lián)系我們,我們將竭誠為您解答和服務(wù)。
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