細胞瞬時(shí)轉染是一種常用的實(shí)驗技術(shù)，用于將外源DNA或RNA導入細胞內，以研究基因表達、功能和調控機制。以下是細胞瞬時(shí)轉染的一般步驟和注意事項。今天讓我們一起探討轉染效率低下的原因，以為提高轉染效率！

一、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟一

提前一天鋪板，并且確保細胞均勻分布，具體鋪板技巧，請翻看之前文章，細胞鋪板總是鋪不均勻?別急，方法來(lái)了！轉染前將細胞培養至70-80%的密度，以確保細胞處于活躍的生長(cháng)狀態(tài)。

二、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟二

轉染試劑和質(zhì)粒準備：根據轉染試劑的說(shuō)明書(shū)準備轉染試劑和質(zhì)粒DNA。轉染試劑的用量通常根據細胞類(lèi)型和轉染效率來(lái)確定，一般為2-10μL/孔（對于24孔板）。質(zhì)粒DNA的用量通常為0.1-1μg/孔（對于24孔板），具體用量需根據實(shí)驗目的和轉染效率進(jìn)行優(yōu)化。

三、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟三

混合轉染試劑和質(zhì)粒：在無(wú)菌條件下，將轉染試劑和質(zhì)粒DNA混合在無(wú)血清培養基中，質(zhì)粒和轉染試劑混合后需用槍輕輕混勻，輕輕混合后孵育5-30分鐘，以形成轉染復合物。

四、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟四

轉染復合物添加到細胞：將轉染復合物添加到細胞培養孔中，輕輕搖動(dòng)以確保均勻分布。

五、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟五

孵育：將細胞培養板放回培養箱中，孵育一定時(shí)間（通常為24-48小時(shí)），以便DNA進(jìn)入細胞并表達。

六、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染步驟六

觀(guān)察和分析：根據實(shí)驗目的，可以通過(guò)可熒光顯微鏡下通過(guò)熒光觀(guān)察轉染效率或提蛋白跑WB進(jìn)行驗證。

七、翌圣生物PEI轉染試劑瞬時(shí)轉染部分產(chǎn)品列表

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