液體培養基的常見(jiàn)問(wèn)題
液體培養基是最為常見(jiàn)的培養基類(lèi)型,它具有可進(jìn)行通氣培養或振蕩培養的優(yōu)勢,因為它的流動(dòng)性便于精確控制培養基的溶液溫度、營(yíng)養濃度和氣體含量等;它對細胞生長(cháng)時(shí)的附著(zhù)能力要求小,細胞可快速擴增;當需要大量細胞培養時(shí)也更經(jīng)濟高效。那么你知道液體培養基的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、液體培養基為什么顏色不一樣
酚紅加量不同,導致顏色差異:DMEM>MEM>DMEM/F12>RPMI1640>F12&F10。
二、培養基放冰箱里顏色變深
空氣中CO2濃度低,培養基內CO2會(huì )逐漸溢出,HCO3-減少,造成培養基偏堿。
三、含有谷氨酰胺培養基的保存條件
谷氨酰胺對溫度敏感,溫度越高降解速度越快。谷氨酰胺在溶液中不穩定,單獨保存應置于-20℃冰箱中。加有谷氨酰胺的液體培養基應存放在2°C–8°C,或者購買(mǎi)不含谷氨酰胺的培養基使用時(shí)添加。
四、液體培養基可以放-20℃及以下保存嗎
不可以。在-20℃下,培養基中的鹽容易析出,培養基融化后,有些鹽無(wú)法重新溶解,從而導致滲透壓降低。液體培養基放在2-8℃長(cháng)期保存。液體培養基保存要避光。培養基中的某些成分遇光會(huì )產(chǎn)生過(guò)氧化氫,具有細胞毒性
五、購買(mǎi)的液體培養基可以保存多久
理論上只要保存得當,保質(zhì)期范圍之內都可以用。但實(shí)際開(kāi)瓶后保存時(shí)間過(guò)長(cháng)會(huì )導致液體培養基中鹽分的析出和pH值的改變,因此建議開(kāi)瓶后盡快用完
六、更換培養基后細胞長(cháng)不好
?。?)各廠(chǎng)家培養基配方并非完q相同,可能細胞已經(jīng)適應當前的培養體系;
?。?)原代細胞更容易適應新的培養基,而傳代細胞系更換比較難;
?。?)剛復蘇的細胞不要用來(lái)適應新培養基,細胞活率低,待狀態(tài)穩定后再用來(lái)馴化;
?。?)敏感性細胞適應培養基,需要多馴化幾代,期間細胞死亡數量減少,生長(cháng)緩慢是正?,F象。
七、DPBS和PBS有什么區別,能通用嗎
都屬于磷酸鹽緩沖液,成分上只有一點(diǎn)點(diǎn)磷酸鹽的含量差異,均有等滲和調節pH的功能,大多數對于細胞的使用上可以通用。
八、HBSS和PBS/DPBS有什么區別
HBSS緩沖液中鹽成分較PBS和DPBS更復雜,且含有葡萄糖,可為細胞提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養,而PBS/DPBS不能提供營(yíng)養。
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