在培養貼壁細胞的時(shí)候,偶爾會(huì )出現細胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長(cháng)得非常密集,有的地方卻太稀疏。雖然這對于常規培養并不算大問(wèn)題,但有時(shí)則可能影響后續的實(shí)驗進(jìn)程。
所以一旦遇到貼壁不勻,建議排查原因并優(yōu)化操作方案。那么,造成細胞貼壁不均勻的原因有哪些呢?本期內容一起來(lái)跟著(zhù)小編的腳步學(xué)習一下吧!
情況一:局部生長(cháng)密集,密集處呈不規則分布
原因:一般是接種時(shí)沒(méi)有混勻,或者細胞傳代時(shí)沒(méi)有消化che底從而形成細胞團塊導致的
解決方案:繼續培養1-2天,待細胞狀態(tài)穩定后,重新消化接種,接種時(shí)注意使用十字法或8字法混勻,接種后顯微鏡下確認細胞是否分散為單個(gè)細胞。
情況二:培養器皿中央生長(cháng)密集,邊緣稀疏
原因:十字法或8字法混勻時(shí)搖晃次數過(guò)多,液體形成漩渦所導致
解決方案:繼續培養1-2天,待細胞狀態(tài)穩定后,重新消化接種。在混勻時(shí)搖晃5-6次即可。
情況三:細胞在培養器皿的半邊生長(cháng),形成明顯分界線(xiàn)
原因: 這可能是培養箱架子不平造成的
解決方案:可通過(guò)調節培養箱架子以保持水平解決。
情況四:細胞形成同心圓,并靠邊緣生長(cháng)
原因:這是由于培養箱風(fēng)扇故障或設備震動(dòng)導致
解決方案:在培養器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解,檢查培養箱風(fēng)扇是否正常運轉。
以上就是有關(guān)于細胞貼壁不均勻的原因有哪些的問(wèn)題解答,對于前兩種情況,一般是傳代操作造成的,重新接種即可解決;而后兩種情況是硬件設施造成的,則需要調試設備。如果你還有其他問(wèn)題請咨詢(xún)百奧創(chuàng )新客服!
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