你知道細胞培養的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、培養細胞不貼壁
原因:
1.胰蛋白酶消化過(guò)度;
2.支原體污染;
解決方法:
1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;
2.分離培養物,檢測支原體。清潔支架或培養箱。如發(fā)現支原體污染,丟棄培養物;
二、懸浮細胞成簇
原因:
1.培養液中含鈣,鎂離子;
2.支原體污染;
3.蛋白酶過(guò)度消化使得細胞裂解;
解決方法:
1.用無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞,輕巧吹吸
2.細胞獲得單細胞懸液;
3.分離培養物,檢測支原體;
三、培養細胞生長(cháng)緩慢
原因:
1.由于更換不同培養液或血清;
2.培養液中一些細胞生長(cháng)必須成分如谷氨酰胺或生長(cháng)因子耗盡或缺乏或已被破壞;
3.培養物中有少量細菌或真菌污染;
解決方法:
1.比較新培養液與原培養液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長(cháng)實(shí)驗,讓細胞逐漸適應新培養液;
2.換入新鮮配置培養液,或補加谷氨酰胺及生長(cháng)因子;
3.用無(wú)抗生素培養液培養,如發(fā)現污染,丟棄培養物;
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