哺乳動(dòng)物細胞瞬時(shí)轉染能在短期內快速表達高活性蛋白而被廣泛應用。那么細胞瞬時(shí)轉染的原理是什么?讓我們一起來(lái)看看吧!
哺乳動(dòng)物細胞自身具有蛋白折疊和翻譯后修飾的功能,獲得的蛋白更具有天然活性。哺乳動(dòng)物細胞生產(chǎn)蛋白的方式有兩種:瞬時(shí)轉染和穩定轉染。瞬時(shí)轉染的特點(diǎn)是短期快速表達,滿(mǎn)足蛋白的小量制備。而穩定轉染通過(guò)構建穩定細胞系能夠滿(mǎn)足蛋白的大量、長(cháng)期生產(chǎn)。
瞬時(shí)轉染的原理是指將構建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導入到哺乳動(dòng)物細胞內,該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。隨著(zhù)細胞的生長(cháng)分裂,外源基因會(huì )逐漸丟失。質(zhì)粒在細胞內能夠存在3-4天,此時(shí)間內,質(zhì)粒外源基因在細胞內發(fā)生轉錄翻譯,得到極為少量的蛋白。這一整個(gè)快速轉染得到蛋白的過(guò)程就稱(chēng)為瞬時(shí)轉染表達。
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