細胞培養做為生物學(xué)研究最基礎的技術(shù)之一，可以說(shuō)是滲透科研界的方方面面。那么細胞實(shí)驗中的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？應該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、如何選用細胞系培養基？

優(yōu)先根據細胞來(lái)源公司提供的培養條件，。一般建議不要隨意更換培養基種類(lèi)。細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用與原先提供的培養條件不同的培養基，可能造成細胞形態(tài)發(fā)生變化或無(wú)法存活，以及細胞的表型功能丟失。

二、細胞發(fā)生微生物污染時(shí)，應如何處理？

直接丟棄或更換，將未受污染的細胞轉移至其它培養箱，并用消毒劑消毒培養器皿和超凈臺以及二氧化碳培養箱。如發(fā)生真菌霉菌污染，需用紫外燈照射整個(gè)細胞間，從而消除可能產(chǎn)生的孢子。同時(shí)排除使用試劑的污染，包括培養基和血清，可以空培試驗。

三、為何培養基用一段時(shí)間后，顏色偏紫？

培養基隨著(zhù)多次開(kāi)蓋會(huì )使培養液 CO2 逐漸溢出，造成培養基越來(lái)越偏堿性從而變紫，尤其是剩余的培養基越少越容易變紫?？蓪⑴囵B瓶瓶蓋旋松放入二氧化碳培養箱校正溶液 PH 值，過(guò)一段時(shí)間就會(huì )變回正常。變紫的培養基是可以繼續使用的，培養細胞時(shí)在培養箱會(huì )自動(dòng)恢復顏色。

四、細胞培養液變黃變渾，如何處理？

細胞培養液變黃多半是細胞密度過(guò)大，細胞增殖速度過(guò)快，產(chǎn)生大量酸性代謝廢物，導致細胞營(yíng)養不足。而培養液變渾多半是發(fā)生了細菌污染。出現這種情況應立即進(jìn)行消化傳代處理。

五、血清中出現的沉淀是什么，有影響嗎？

① 纖維蛋白，是經(jīng)常出現的較大沉淀物，可達到 1～2 mm，用肉眼可觀(guān)察到；

② 膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)，是血清出現沉淀物的常見(jiàn)原因；

③ 磷酸鈣，也是一種常見(jiàn)沉淀物，通常會(huì )使血清出現渾濁，并且在 37 ℃ 培養時(shí)會(huì )增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀(guān)察像小黑點(diǎn)，這些小黑點(diǎn)由于布朗運動(dòng)看上去可以活動(dòng)，因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。

這些沉淀對細胞的生長(cháng)是沒(méi)有影響的，如想去除沉淀，盡量采用離心方法，不建議使用過(guò)濾方法，因為會(huì )堵塞濾膜而且會(huì )造成污染的風(fēng)險。

六、細胞支原體污染如何處理？

支原體污染是比較難去除的，特別容易復發(fā)，一般建議直接更換新的細胞，如特別精貴或重要的細胞可嘗試使用四環(huán)素、大環(huán)內酯類(lèi)抗生素（泰樂(lè )霉素）、喹諾酮類(lèi)抗生素。

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