ATCC,全名為:American Type Culture Collection,細胞庫的細胞數量排名qian列。ATCC細胞培養方法,廣泛應用于生產(chǎn)領(lǐng)域和生物醫學(xué)研究,已成為細胞培養的標準。該方法共分為6大步驟,分別是:
一、培養基的選擇:細胞種類(lèi)不同,培養基的選擇不同,常見(jiàn)的培養基有:MEM培養基、RPMI培養基、DMEM培養基等。根據細胞類(lèi)型不同,選擇性的加入10%的胎牛血清、抗生素、抗真菌藥物等。
二、細胞的準備:取出細胞,置于無(wú)菌條件,用PBS(含有鈣和鎂)2-3次洗滌細胞,去掉凍存液。
三、細胞的接種:將細胞轉移到無(wú)菌培養皿(含有培養基)。培養皿容積應根據培養時(shí)間、細胞數量來(lái)確定。
四、細胞培養:將培養皿放置在37℃的培養箱中,保持濕潤的環(huán)境。定期更換培養基(頻率為:2天/次)。細胞密度需要控制,不要過(guò)度密集。
五、細胞分離:細胞密度達到一定程度后,用胰酶或EDTA等酶類(lèi)將細胞進(jìn)行消化,消化后的細胞分離到新的培養皿中。
六、細胞凍存:細胞密度適中時(shí),用液氮來(lái)凍存細胞。
注意:1.細胞培養的整個(gè)過(guò)程都需要消毒處理,防止細胞被污染 。
2.定期檢查細胞的各項指標,如生長(cháng)情況、細胞狀態(tài)、是否污染等。
上述ATCC細胞培養方法,助您細胞培養一臂之力!
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