1.簡(jiǎn)介

CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus是一組弱陽(yáng)離子交換色譜填料。CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus結合容量和結合動(dòng)力學(xué)高于IEX  SepFast  6HF系列。CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus特別適用于需要增加結合能力的生物分子的一般大規模純化。

CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus在配體密度、負載量和單個(gè)組分的分離能力之間進(jìn)行了平衡設計，適用于大規模生物制造應用。

CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus的基質(zhì)由高度交聯(lián)的 6%瓊脂糖和葡聚糖制成，具有優(yōu)異的流動(dòng)性。它對生物加工行業(yè)中遇到的大多數化學(xué)條件都非常穩定。

2.產(chǎn)品特性

表1  CM SepFast 6HF Plus的特性

*測試條件：10  mM緩沖液 pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì)，停留時(shí)間5分鐘，50%穿透。

**在 32  mm內徑色譜柱中，床高 15 cm，室溫下用水測量。

圖1 IEX  SepFast  Media的壓力-流動(dòng)特性

（備注：將基礎基質(zhì)填充到32 mm內徑的柱子中，最終床?為15 cm。流動(dòng)相是去離子水。測試在室溫下進(jìn)行）

圖2 滴定曲線(xiàn)

3.方法優(yōu)化

建議在載量、流速、結合pH值、結合離子強度、洗脫速度和梯度等參數之間進(jìn)行篩選。由于CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus的快速孔隙可及性，結合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得最佳分離能力。

強離子交換色譜填料可以在較寬的pH范圍內保持其電荷（并因此保持其功能），而弱離子交換色譜填料的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此，如果使用弱離子交換色譜填料，優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。

通常，在優(yōu)化方法時(shí)，平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外，對于不穩定或對剪切力敏感分子的純化，需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對目標分子可能造成的損害。

4.裝柱

CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成，具有出色的機械強度。該色譜填料可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類(lèi)型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達3 bar。

5.保養

根據不同的應用，色譜填料可能會(huì )被多次使用。如需重復使用，請參閱以下說(shuō)明。

（1）再生

每次運行后，用高離子強度溶液（例如1M NaCl緩沖液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一種去除強結合物質(zhì)的程序，例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚，并有助于保持色譜柱性能。

應根據存在的污染物類(lèi)型為每個(gè)過(guò)程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個(gè)應用的性質(zhì)。

以下信息可作為一般指導：濃度高達2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結合的雜質(zhì)。疏水性結合的污染物可以通過(guò)以下試劑去除：1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑（例如0.1-2%）、堿性或酸性條件下的30%  異丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述試劑的組合。一般來(lái)說(shuō)，孵育時(shí)間應該更長(cháng)（例如從 30 min到2 h），以確保污染物WAN全解離。

（3）消毒

建議使用接觸時(shí)間為1 h的0.5?1.0 M NaOH進(jìn)行消毒。

6.儲存

CM離子交換色譜填料SepFast 6HF Plus應儲存在20%乙醇中（強陽(yáng)離子交換色譜填料含有0.2 M NaAC）以防止微生物生長(cháng)。將色譜填料存儲在4℃到30℃的溫度下。使用前，用至少5床體積的運行緩沖液來(lái)平衡色譜填料。

7.更多信息

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8.訂購信息