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細胞轉染的方法和PEI Prime ™的介紹

 更新時(shí)間:2022-01-21 點(diǎn)擊量:2037

細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術(shù)。隨著(zhù)分子生物學(xué)和細胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗中,其應用越來(lái)越廣泛。

轉染,是將外源性基因導入細胞內的一種專(zhuān)門(mén)技術(shù)。隨著(zhù)基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實(shí)驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學(xué)介導和生物介導三類(lèi)途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過(guò)物理方法將基因導入細胞的范例;化學(xué)介導方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導的技術(shù);生物介導方法,有較為原始的原生質(zhì)體轉染,和現在比較多見(jiàn)的各種病毒介導的轉染技術(shù)。

理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導的轉染技術(shù),是目前轉染效率高的方法,同時(shí)具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是,病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類(lèi)型有很強的選擇性,在一般實(shí)驗室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導的轉染方法,則各有其特點(diǎn)。

需要指出的一點(diǎn),無(wú)論采用哪種轉染技術(shù),要獲得*的轉染結果,可能都需要對轉染條件進(jìn)行優(yōu)化。影響轉染效率的因素很多,從細胞類(lèi)型、細胞培養條件和細胞生長(cháng)狀態(tài),到轉染方法的操作細節,都需要考慮。

常見(jiàn)的轉染方法是脂質(zhì)體轉染法:

陽(yáng)離子脂質(zhì)體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過(guò)靜電作用,將DNA分子包裹入內,形成DNA脂復合物,也能被表面帶負電的細胞膜吸附,再通過(guò)融合或細胞內吞進(jìn)入細胞。脂質(zhì)體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養細胞中,是目前實(shí)驗室便捷的轉染方法之一,其轉染率較高,優(yōu)于磷酸鈣法。由于脂質(zhì)體對細胞有一定的毒性,所以轉染時(shí)間一般不超過(guò)24小時(shí)。常用細胞類(lèi)型:cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。

 

 

   
 

 

 

美國serochem公司成立于2019年,目標是使基因治療和生物制劑價(jià)格合理。目前,該公司主要進(jìn)行PEI Prime?相關(guān)的兩款產(chǎn)品(液體和固體兩種)。

PEI是聚乙烯亞胺的縮寫(xiě)。pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結合,并賦予凈陽(yáng)離子電荷,使DNA進(jìn)入細胞。當下,PEI是流行的瞬時(shí)轉染試劑HEK293CHO懸浮培養液。serochem旗下的PEI Prime是一種高性能轉染試劑,旨在實(shí)現高產(chǎn)量,可重復性,和可擴展的瞬時(shí)基因表達,且其是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的很好選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。

PEI Prime ™是基于PEI基礎上的高性能轉染試劑,是化學(xué)轉染中的陽(yáng)離子聚合物轉染試劑;在HEK293CHO細胞懸浮培養中具有高效性;制備簡(jiǎn)單,價(jià)格適中,適合大規模瞬時(shí)轉染;比PEI所需時(shí)間較少。

PEI Prime的設計著(zhù)眼于在PEI可擴展性基礎上,進(jìn)一步提高,這使其成為可以用于大規模瞬時(shí)基因表達具有成本效益的試劑。無(wú)論轉染一毫升還是一百萬(wàn)升培養基,我們都會(huì )提供較優(yōu)的性能,服務(wù)和價(jià)格。而北京百奧作為其國內代理,本著(zhù)一心為客戶(hù)著(zhù)想,認真為客戶(hù)負責的宗旨,介紹并推薦此產(chǎn)品。

 

 

 

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