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細胞轉染的分類(lèi)方法

 更新時(shí)間:2023-10-19 點(diǎn)擊量:495
  細胞轉染是指將外源性基因導入到細胞內的技術(shù)。那你知道細胞轉染的分類(lèi)方法是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
  一、根據導入的核酸存在的時(shí)間長(cháng)短,可分為瞬時(shí)轉染和穩定轉染
  瞬時(shí)轉染:指將構建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導入到哺乳動(dòng)物細胞內,該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細胞自身的基因組上。
  細胞中瞬時(shí)轉染的外源基因表達時(shí)間有限,通常僅持續幾天,直到外源基因在細胞分裂過(guò)程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調控元件的分析。
  穩定轉染:外源DNA整合到細胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細胞中。與瞬時(shí)轉染不同,穩定轉染能夠整合到宿主基因組,因此轉染細胞及其子代細胞的基因組中會(huì )同時(shí)保留轉染的DNA。
  由于穩轉效率較低,因此選用有效的細胞轉染方法很重要。
  二、根據轉染方式可以分為化學(xué),生物,物理方法
  化學(xué)方法:利用載體分子包被核酸使其呈現中性電荷或正電荷。如陽(yáng)離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽(yáng)離子物質(zhì)介導等技術(shù)。
  生物方法:利用基因工程病毒轉染非病毒基因到細胞中?,F在比較多見(jiàn)的是各種病毒介導的轉染技術(shù)。
  物理方法:在細胞膜表面產(chǎn)生一個(gè)瞬時(shí)的孔從而導入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。
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