流式最早的時(shí)候是從流體力學(xué)發(fā)展而來(lái)的。1738年, 瑞士物理學(xué)家、數學(xué)家丹尼爾·伯努利出版了《流體動(dòng)力學(xué)》。證實(shí)了流體在重力場(chǎng)中流動(dòng)時(shí)能量守恒的原理。這個(gè)原理就是后來(lái)廣泛被用于在流式細胞儀上實(shí)現高速單細胞液流的基本原理。并在隨后的兩百年時(shí)間里不斷的演變發(fā)展。那么你知道傳統流式、全光譜流式和質(zhì)譜流式有什么不同嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、傳統流式
傳統的流式細胞儀主要由四部分組成。
分別是流動(dòng)室和液流系統;激光源和光學(xué)系統;光電管和檢測系統;計算機和分析系統。
基本外觀(guān)如下:
內部結構圖大致如下:
二、質(zhì)譜流式
質(zhì)譜技術(shù)早在1906年,J.JThomson在實(shí)驗中發(fā)現帶電荷的離子在電磁場(chǎng)中的運動(dòng)軌跡與它的質(zhì)荷比有關(guān)。并于1912年制造出第一臺質(zhì)譜儀。質(zhì)譜流式細胞技術(shù)是在傳統流式和質(zhì)譜技術(shù)的基礎上發(fā)展起來(lái)的,它結合了流式技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù),利用質(zhì)譜原理對單細胞進(jìn)行多參數檢測的流式技術(shù)。國內出現了辰安、譜育等質(zhì)譜流式細胞儀生產(chǎn)廠(chǎng)家。質(zhì)譜流式細胞儀有別于傳統流式技術(shù)的基于熒光素進(jìn)行抗體標記,它采用的是用金屬標簽抗體標記的細胞進(jìn)入質(zhì)譜流式細胞儀。逐個(gè)通過(guò)ICP質(zhì)譜檢測裝置,然后標記好的細胞就被分離成單個(gè)細胞并依次進(jìn)入等離子體炬進(jìn)行離子化。然后被送入飛行時(shí)間質(zhì)譜。最后對每個(gè)細胞中各種金屬標簽進(jìn)行定量檢測。進(jìn)而得知每個(gè)細胞中各目標蛋白的含量。由于通過(guò)每個(gè)離心飛行時(shí)間來(lái)統計的,跟光譜流式分析wan全不一樣,這就不用進(jìn)行熒光補償了。
三、全光譜流式
全光譜流式跟傳統的流式是比較像的,包括儀器的結構、檢測原理、所使用的熒光染料等原料基本上都一樣。wei一不同的就是,傳統流式是實(shí)時(shí)反應測試結果的,由于各濾光片有濾光誤差,多種熒光染料同時(shí)檢測時(shí)會(huì )導致很多熒光遺漏或增加,這樣就需要調補償。而全光譜流式是事項每個(gè)染料上機一次,形成標準,儀器會(huì )自動(dòng)把所有的染料對應的熒光光譜組合成一個(gè)方案。后面多種染料同時(shí)上機檢測時(shí),儀器通過(guò)染料的波形去方案庫里尋找對應的方案,然后再把這個(gè)方案預先儲存的波形調用出來(lái)顯示出來(lái)。
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